因血糖受许多生理条件的影响而日夜波动，故试验时间最好在上午7-8时进行。试验前一日晚餐后禁食，但可以饮白开水。试验前休息30分钟，抽隔夜空腹血（以此时为0分钟）后将溶于250-350 ml开水中的75g葡萄糖在5分钟内饮完，然后在第30、60、120和180分钟分别采静脉血测血糖（必要时可延长到4-5小时），同时每次收集尿液测尿糖。