6.2 两栖类的采集和标本制作
一、我国两栖类常见种类的分布概况
我国的两栖类动物约有200种，大多分布于淡水水域及其沿岸一带，少数分布于农田和森林地区，草原地区的两栖类种类很少。
在淡水水域和沿岸一带，北方常见的无尾两栖类有黑斑蛙（Rana nigromaculata）、花背蟾蜍（Bufo raddei）、东方铃蟾（Bombina orientalis）、北方狭口蛙（Kaloula borealis）、无斑雨蛙（Hyla arborea immaculata）等；有尾两栖类有东北小鲵（Hynobius leechii）、极北小鲵（Hynobius keyserlingii）、爪鲵（Onychodactylus fischeri）等。南方常见的无尾两栖类有雨蛙属（Hyla）、沼蛙（Rana guentheri）、泽蛙（Rana limno-charis）、虎纹蛙（Rana tigrina）、树蛙属（Rhacophorus）、大蟾蜍（Bufo bufo gargarizans）、黑眶蟾蜍（Bufo melanosti-ctus）等；有尾两栖类有肥螈（Pachytriton brevipes）、东方蝾螈（Cynops orientalis）、中国瘰螈（Trituroides chinensis）、大鲵（Megalobatrachus davidianus）等。
农田中的两栖类，北方常见的有花背蟾蜍、中华大蟾蜍（Bufo bufo）、黑斑蛙、中国林蛙（Rana temporaria chensi-nensis）等；南方常见有虎纹娃、泽蛙、黑眶蟾蜍、雨蛙和各种林蛙、树蛙等。
在森林方面，东北针阔叶混交林地区，两栖类很贫乏，仅有分布于我国北部的一些种类，如无斑雨蛙、花背蟾蜍、黑斑娃、中国林蛙、东方铃蟾等；华北落叶阔叶林地区的两栖类也很贫乏，常见种类有中华大蟾蜍、花背蟾蜍、黑斑蛙等；南方丘陵地带的常绿阔叶林和灌丛地区，常见的两栖类有日本林蛙（Ranajaponica）、棘胸蛙（Rana spinosa）、斑腿树蛙（Rhacophorusleucomystax）等。此外尚有一些种类在不同地区比较多见，如秦巴山地的无尾两栖类隆肛蛙（Rana quadranus）、秦岭雨蛙（Hyla tsinlingensis）、合征姬蛙（Microhyla mixtura）和有尾两栖类的秦巴北鲵（Ranodon tsinpaensis）等；在南部山地的无尾两栖类有棘胸蛙、隆肛蛙、淡肩角蟾（Megophrus boettgeri）、三港雨蛙（Hyla sanchiangensis）、花臭蛙（Rana schmackeri）、华南湍蛙（Staurois ricketii）等，有尾两栖类有肥蝾、东方蝾螈等；云贵高原有华西雨蛙（Hyla annectans）和粗皮姬蛙（Micro-hyla butleri）等。
草原上的两栖类常见种只有花背蟾蜍一种。
二、两栖类的活动规律
两栖类的活动规律主要表现在季节性活动和昼夜活动两个方面。
1.季节性活动
我国北方地区的两栖类，一般约在3～5月份结束冬眠，开始苏醒；南方则提早1～2个月左右，如蟾蜍在2月份、黑斑蛙和泽蛙在4月份苏醒。有些种类苏醒后立即进入繁殖期，如大蟾蜍；但有些种类则在以后才进入繁殖期，如泽蛙。春夏两季是两栖类繁殖、生长发育和觅食主要时期。秋末天气渐冷便陆续进入冬眠。不同地区、不同种类的冬眠时间和冬眠地点常不相同，如大鲵多在深洞或深水中冬眠，黑龙江林蛙（Rana amurensis）在河水深处的沙砾或石块下冬眠，大蟾蜍则多潜伏在水底或烂草中冬眠等等。
2.昼夜活动
无尾两栖类大多夜间活动，它们白天匿居于隐蔽处，以躲避炎热天气，如大蟾蜍常匿居于杂草丛生的凹穴内，黑斑蛙多匿居于草丛中等等。黎明前或黄昏时活动较强，雨后更加活跃。但少数种类如泽蛙则在白昼活动。有尾两栖类一般也多在夜间活动，如大鲵白天潜居在有回流水的细沙的洞穴内，傍晚或夜间出洞活动，只在气温较高的天气，才在白天离水上陆在岸边活动。
三、两栖类的采集
1.采集用具
(1)捕网：用于捕捉水中或岸边活动的无尾类。结构与昆虫捕网相同。其网袋要用孔目较大的尼龙纱制成，以利透水。
(2)钓竿：用于钓捕无尾类。竿的顶端系一细绳，绳端缚有蝗虫等诱饵。
(3)布袋：用于盛放两栖类成体。
(4)记录本及铅笔。
2.采集的时间和环境
(1)采集时间。北方地区的3～8月，南方地区的2～9、10月，都有两栖类进行繁殖，尤其是3～7月，进行繁殖的种类最多，是采集的最好时期。在此时期中，雌、雄成体会集到水域或近水域的场所，相互抱对产卵，此时不仅可采到许多成体，也可采集卵和蝌蚪。
(2)采集环境。适合采集两栖类的环境，一般是草木繁茂、昆虫滋生、河流、池塘和山溪较多的地方。在这样的环境中，两栖类的种类和个体数目最多。
3.采集方法
(1)无尾两栖类的采集方法。对活动能力较弱的种类如大蟾蜍、花背蟾蜍和中国林蛙，可用手直接捕捉；对水中活动和跳跃能力较强的种类，如黑斑蛙、金线蛙（Rana plancri）、蝾螈等，可用网捕捉；有些种类栖息于洞穴，水边或稻田草丛中，如虎纹蛙，可用钓竿进行诱捕。诱捕时，一手持钓竿，不时抖动钓饵，诱蛙捕食。蛙类具有吞食后不轻易松口的特点，可以利用这一特点进行捕捉。
无尾两栖类在夜间行动迟缓，尤其在手电筒照射时，往往呆若木鸡，很好捕捉。但夜间路途难行，采集者如果道路不熟悉，容易落入水中。因此组织中学生采集两栖类时，应安排在白天进行，以防止发生意外。
(2)有尾两栖类的采集方法。有尾两栖类大多为水栖，而且大多栖居在高山溪流的浅水中，白天多潜伏在枯枝落叶的石块下或石缝中。可在白天翻动石块寻找。有些种类生活在山区水塘中，如肥螈、瘰螈等，当水清时，常能从水上看到它们。这些种类性情温和，游动缓慢，可用手捕捉或用网捕捞。
四、两栖类的成体测量和记录
1.测量用具用品
(1)体长板：用于测量成体各部分长度。其规格和质地与测量鱼类的体长板相同。
(2)乙醚：用于麻醉杀死动物。
(3)号牌（竹制）、记录本、铅笔等。
2.测量准备工作
将活的成体用乙醚麻醉杀死，然后用清水洗涤干净，栓好号签。
3.测量内容
(1)无尾两栖类的主要测量部位（图6－2）。
体长 自吻端至体后端。
头长 自吻端至上、下颌关节后缘。
头宽 左右关节之间的距离。
吻长 自吻端至眼前角。
前臂及手长 自肘关节至第三指末端。
后肢长 自体后端正中部分至第四趾末端。
胫长 胫部两端间的长度。
足长 内趾突至第四趾末端。(2)有尾两栖类的主要测量部位（图6－3）。
体长 自吻端至尾端 头长 自吻端至颈褶
头宽 左右颈褶间的距离（或头部最宽处）
吻长 自吻端至眼前角
尾长 自肛孔后缘至尾末端
尾宽 尾基部最宽处
4.记录
按两栖类成体野外采集记录表栏目进行记录，见表6－2。
表6—2 两栖类成体野外采集记录表
五、标本制作
两栖类大多根据外形和内部骨胳特点进行分类检索。因此，在采集和测量记录之后，应制作浸制标本和骨胳标本。现以蛙类为例，说明标本制作过程。
1.浸制标本制作
(1) 用具用品
①解剖盘、标本瓶、注射器：用于盛放标本和向标本注射固定液。
②福尔马林液：用于固定和保存标本。
(2) 制作方法步骤。浸制标本的制作方法比较简单，只需经过固定和保存两个步骤。
①固定。将已处死的标本放置在解剖盘上，先向腹内注射适量的5～10%福尔马林溶液，再放入盛有5～10%福尔马林的标本瓶中进行固定，固定时应将标本的背部朝上，四肢做成生活时的匍匐状态，并将指、趾伸展好。固定时间约需数小时至1天左右。
②保存。将标本放入5%福尔马林液或70%酒精液中浸泡保存。
2.骨胳标本制作
(1) 用具用品
①解剖刀、解剖剪、镊子：用于剔除软组织。
②玻璃水槽、解剖盘：用于制作过程中盛放标本。
③卡片纸、大头针、胶水：用于对标本进行定形和固定。
④标本台板：用于放置骨胳标本，用木板制成。
⑤0.5～0.8%氢氧化钠溶液：用于腐蚀标本上的残存肌肉。
⑥汽油：用于脱掉标本上的脂肪。
⑦3%过氧化氢：用于漂白标本。
(2)制作方法步骤。骨胳标本的制作方法比较复杂，需要经过剔除软组织、腐蚀、脱脂、漂白、整形和装架等步骤。
①剔除软组织。包括剥皮、去内脏和剔肌肉三部分内容。剥皮应从腹部开始，用剪刀剖开腹部皮肤，陆续剥向身体各部。在剥皮过程中，注意不要拉断指骨和趾骨。皮肤剥净后，再挖掉内脏和眼球，随后进行剔肉。剔肉时，不要将头骨、肩带和四肢骨的各个关节相连的韧带剔掉，以借助韧带保持各关节的联系。当肌肉基本剔净后，在颈椎和枕骨之间的缝隙中，向颅腔中插入适当粗细的铅丝，将脑组织破坏，再将铅丝插入椎骨，将脊髓挤压出来。然后用水将标本冲洗干净。
②腐蚀。将已剔除软组织的骨胳浸入0.5～0.8%氢氧化钠中，腐蚀残存的软组织。约1～3天后取出，在清水中进行冲洗。此时，骨胳上的软组织已被腐蚀干净。
③脱脂。将经过腐蚀的骨胳，放入汽油中进行脱脂。脱脂时间约需1～2天。
④漂白。将已脱脂的骨胳浸泡在3%过氧化氢溶液中，进行漂白。漂白时间约需1～4天，在漂白期间要经常检查，只要标本已经洁白，就要及时取出。
⑤整形。将已漂白的骨胳平放在木板或泡沫塑料板上，将躯体和四肢按自然姿态整理好，并用卡片纸条和大头针固定在板上，以防止标本在干燥过程中变形。在下颌和胸椎骨下面，要用纸团垫起，使其成生活时头部抬起的状态。还要将两个上肩胛骨附着在第二、三颈椎横突的两侧，待骨胳干燥后，用胶水粘住，使全副骨胳连成一个整体。
⑥装架。将上述已整形的骨胳，放在标本台板上，用胶水将前肢的腕骨和后肢的蹠骨粘在标本台板上，贴上标签，写明编号、名称、采集时间、采集地点、采集人、制作人，即可保存备用。
