10.7 活动方案举例
一、竹节秋海棠叶培育苗
竹节秋海棠（Begonia president-carnotHook.）是常见的观赏植物，枝叶繁茂，鲜艳的花朵和较大的花序美丽诱人，花期长达月余。但它开花不结实，只能通过扦插来繁殖。剪枝扦插影响株形和观赏效果，且繁殖速度慢，用组织培养法则可以在短期内培育出大量的幼苗。
1.活动目的
了解植物组织培养的基本步骤，使中学生掌握用竹节海棠叶培育幼苗的方法。
2.活动设计
①选择健壮、无病害的竹节海棠植株，剪下嫩叶。
②将消毒后的材料接种在附加6-苄基嘌呤0.5毫克/升、萘乙酸0.2毫克/升的MS培养基上进行培养，一段时间后移入生根培养基。
③生根后移栽入花盆或大田。
3.活动开展方法步骤
(1)材料消毒。选择生长健壮、无病害的植株，剪下嫩叶。经清水漂洗、70%酒精表面消毒后，用5～10%漂白粉过滤液或澄清液浸泡约8分钟，然后用无菌水洗3～4次，并用无菌滤纸吸去材料表面的水分。
(2)接种。将消毒过的叶片放在接种箱或超净工作台中切成1～5平方厘米的小块（外植体），接种在MS培养基（附加6-苄基嘌呤0.5毫克/升、萘乙酸0.2毫克/升）上进行培养。培养室温度保持在25～27℃左右，可以用40瓦日光灯二盏，在培养瓶上40厘米处光照，每日8～10小时。叶片切块在接种后3～5天出现愈伤组织，2周左右愈伤组织上出现突起的芽点，以后芽点增多。4周以后可以看到有直径3～5毫米叶片的不定芽，这时将长出多数不定芽的培养物分割成数块，分别接种在原培养基上，经2～3周后，在原来芽的基部分生出大量的不定芽。
(3)诱导生根。将不定芽切下，移入生根培养基即含1/2MS的培养基（可附加吲哚乙酸0.5毫克/升）中诱导生根，经过10天左右就可生根。
(4)移栽。移栽前1～2天，先将培养瓶瓶口打开，让试管苗得到初步锻炼，以适应瓶外的气候条件。移栽时先将试管苗取出，用清水漂洗去粘附在根部的琼脂。然后在移栽土上开一个洞，种入试管苗，覆土后轻压苗周围的土，再小心灌水压根，并用破烧杯或开孔的塑料袋覆盖，使小苗保持在一定湿度下生长。光照不宜太强，温度控制在20～30℃左右，培养2～3周后，可除去覆盖物，增加光强。待植株根系发达，地上部分生长健壮时，即可移栽入大田。
二、双色茉莉的组织培养
双色茉莉（Brunfelsia acuminate Benth.）为同一植株上开出两种颜色的花，一为淡紫，一为雪白，色型优美，深受人们喜爱。双色茉莉可用压条和扦插来繁殖，但繁殖系数不高，苗木质量欠佳。用组织培养法则可以加快繁殖速度，提高苗木质量。
1.活动目的
了解植物组织培养的基本步骤，使中学生掌握双色茉莉的组织培养方法。
2.活动设计
①选取无病害的健壮植株，剪下嫩枝及叶。
②接种在MS基本培养基（附加吲哚乙酸0.5毫克/升、6-苄基嘌呤1毫克/升）上进行培养。
③移入1/2MS培养基（附加吲哚丁酸0.4毫克/升）中诱导生根。
④生根后移栽入花盆或大田。
3.活动开展方法步骤
(1)材料消毒。将双色茉莉植株上较嫩叶片连同叶柄一起剪下，清水洗去叶片表面的尘土，用5%次氯酸钠溶液消毒，再用无菌水漂洗2～3次，并用无菌滤纸吸去水分。
(2)接种和培养。在无菌条件下，将消毒后的材料接种在MS基本培养基（附加吲哚乙酸0.5毫克/升、6-苄基嘌呤1毫克/升）上进行培养，温度控制在26℃左右，每天用日光灯辅助光照8～10小时。培养一个月左右，可从叶枕处首先分化出芽，以后在整个叶片上都陆续分化出芽。用一片叶持续分化可相继获得100多株幼苗。
(3)诱导生根。将分化出来的幼苗具有3～5片叶时，转移到1/2MS培养基（附加吲哚丁酸0.4毫克/升）中诱导生根，约经10～15天即可生根。
(4)移栽。当试管苗根长到2～3厘米时，即可移入土壤栽培。移栽前，先将瓶塞打开，使空气进入瓶中，2天后取出试管苗，小心洗去根部沾附的琼脂，移栽到通气良好的沙性盆土中，浇透水后罩以塑料薄膜，保持空气湿度，温度控制在15～20℃之间，勿放在阳光下直射。3～4周后，待小苗长出新叶，根系生长正常时，即可移栽入花盆或大田。
（胡亚丽）
本章思考题
1.说明组织培养的概念以及应用情况。
2.为什么一块组织，甚至一个细胞能形成一棵完整的植株。
3.组织培养所用培养基的成分有哪些？培养基怎样配制？
4.如何选择外植体？对各类外植体应怎样进行灭菌。
5.说明组织培养的步骤和方法。
本章作业
参加一次组织培养全过程（包括培养基配制、接种、外植体诱导、生根和移栽）。
本章参考书目
1.中国科学院上海植物生理研究所 1978 《植物组织和细胞培养》 科学技术出版社
2.颜昌敬 1980 《植物组织培养手册》 上海科技出版社
3.桂耀林 1985 《植物组织培养》 科学出版社
4.张丕方 1985 《植物组织培养与繁殖上的应用》 上海教育出版社
（杨 悦）