2021 年春季鄂东南省级示范高中教育教学改革联盟学校期中联考高二生物试卷
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命题学校：黄石二中 命题教师：余 杰 宋艳芳 陈 慰 龚 照 张 真审题教师：李 玲
考试时间：2021 年 04 月 20 日上午 09:00—11:40 试卷满分：100 分
第I 卷（选择题）
一、单选题（本大题共 20 小题，每题 2 分，共 40 分）
1.醋是中国传统的调味品。谷物发酵醋起源于我国，据现有文献记载，我国利用谷物酿醋历史至少在三千年以上，民间传统的酿醋技术流程如下图所示。淀粉加水分解成甜味产物的过程称为淀粉糖化，在食品发酵过程中，常会对淀粉进行糖化处理，糖化的方法基本上分为三类：酸法、 酶法、酸酶结合法。
根据以上信息，结合所学知识对下列选项进行判断，错误的是（ ）
A.进行酒精发酵和醋酸发酵的主要微生物分别是酵母菌和醋酸菌
B.粉碎能使原料与微生物充分接触，加速淀粉分解，有效缩短酿醋时间
C.当粉碎蒸熟的原料温度降低至一定温度时，可以迅速均匀拌入α-淀粉酶，使谷物中的淀粉糖化 D．与醋酸发酵相比，酒精发酵需要在较高温度条件下进行
2.酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。根据所学知 识，判断下列关于制作酸菜的叙述，错误的是（ ）
A.酸菜制作起主要作用的微生物是乳酸菌
B.在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是产膜酵母 C．市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，这是乳酸菌大量
繁殖导致的
D．测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后， 与 N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
3.通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸，生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵过程的叙述，错误的是（ ）
A．谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要适时地通入无菌空气 B．发酵液中碳源和氮源比例的变化不影响谷氨酸的产量 C．菌体中谷氨酸的排出，有利于谷氨酸的合成和产量的提高
D．发酵过程中，发酵液的 pH 会发生变化，此时可以通过加一些物质来调节 pH
4.豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、 乙两菌种分别接入等量的 A、B 两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在 32 h 内定期取样观测发酵效果。下列说法错误的是（ ）
A.该实验的自变量是菌种和发酵时间
B.如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是好氧菌
C.
如果在实验后，发现 32 h 内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间
D.如果甲、乙两菌种的发酵效果都不理想，可以用辐射的方法对它们进行定向改造
5.棉花虫害是影响棉花产量的重要因素，科学家为了提高棉花产量，将苏云金芽孢杆菌的 Bt 抗虫蛋白基因（简称 Bt 基因）转入棉花里并获得高水平表达，让棉花也能产生 Bt 抗虫蛋白以抵抗虫害。1997 年，我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉，这一研究成果表明（ ）
①苏云金杆芽孢菌与棉花的 DNA 空间结构及组成基本相同
②苏云金芽孢杆菌与棉花共用一套遗传密码
③棉花体内合成了 Bt 抗虫蛋白
④苏云金芽孢杆菌和棉花合成蛋白质的方式有相同之处
A．①③ B．②③ C．①④ D．①②③④
6.1972 年，科学家伯格成功构建了第一个体外重组 DNA 分子，从而掀开了重组 DNA 技术的新纪元。重组 DNA 技术的创立把人们带进了一个不可思议的科学世界，使人类获得了打开生命奥秘的金钥匙。下列相关描述错误的是（ ）
A.重组 DNA 技术是在体外对 DNA 分子进行操作，依据的基本原理是基因重组
B.重组 DNA 技术打破了物种之间的生殖隔离，使基因可以在不同物种之间进行交流
C.重组 DNA 技术的核心是将目的基因导入受体细胞
D.重组 DNA 技术获得的蛋白质往往是自然界中现有的蛋白质
7.近年来，基因编辑技术席卷整个生物医学研究领域，它可以像人们编辑文字那样修改 DNA 分子携带的遗传信息，其中 CRISPR/Cas9 是目前最主要的基因编辑工具，我国科学家团队利用CRISPR/Cas9 等技术，将人的亨廷顿舞蹈病致病基因（突变的 HTT 基因）特定位置处的 150 个CAG 三核苷酸重复序列“敲入”猪的 HTT 基因内，获得了人－猪“镶嵌”HTT 基因，成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型。CRISPR/Cas9 基因编辑系统由 SgRNA 和 Cas9 组成，其中SgRNA 是根据靶基因设计的引导 RNA，能准确引导 Cas9 切割与 SgRNA 配对的靶基因 DNA 序列。据此分析，下列相关说法错误的是（ ）
A.Cas9 在功能上类似于限制酶
B.SgRNA 是根据靶基因设计的，所以靶基因不同，SgRNA 的核苷酸序列也不同C．CRISPR/Cas9 在核糖体上合成，若在某基因上下游分别设计 SgRNA，可以实现该基因敲除D．可用 DNA 分子杂交技术检测实验猪细胞基因组内是否含有人－猪“镶嵌”HTT 基因
8.筛选含有目的基因的受体细胞是基因工程中的重要环节。图中 pUC18 是一种
常用质粒，其中 ori 为复制原点，Apr 为青霉素抗性基因，lacZ’基因能合成某
种酶，该酶能将无色染料 X-gal 变成蓝色。已知目的基因插入的位置如图所示， 为快速筛选出只含重组质粒的大肠杆菌，平板培养基内除了大肠杆菌生长所
必需的营养物质和琼脂外，还必须加入（ ）
A．青霉素 B．无色染料 X-gal
C．青霉素和无色染料 X-gal D．青霉素或无色染料 X-gal
9.研究发现人体内 N 基因是正常基因，无 N 基因的人会患严重肾病而早年夭折，甲乙两位同学利用下图中图 1、图 2、图 3 的相关信息，设计出了表格中的基因治疗方案。图 1 是获取的含有 N 基因的 DNA 片段，Sau3A Ⅰ、EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ为三种限制酶，图中箭头所指为三种酶的酶切位点； 图 2 是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图 3 是某质粒结构示意图。下列相关说法正确的是（ ）
项目
设计人
切割目的基因
切割质粒
基因治疗方式
甲 BamH Ⅰ Sau3A Ⅰ 体外
乙 EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ Sau3A Ⅰ、EcoR Ⅰ 体内
A．两种治疗方案均把体内的缺陷基因诱变成了正常基因B．甲同学得到的基因表达载体的类型比乙同学少
C.两种治疗方案均需要用受精卵作为受体细胞
D.若乙同学采取体外基因治疗的方法，效果会更可靠
10.科学家将葡萄糖异构酶的第 138 位甘氨酸用脯氨酸替代，结果它的最适温度提高了 10-12℃。据分析，脯氨酸替代甘氨酸后，由于引入了一个吡咯环侧链，刚好填充于 138 位甘氨酸附近的空洞，使蛋白质空间结构更具刚性，从而提高了酶的热稳定性。下列说法正确的是（ ）
A．蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异B．对葡萄糖异构酶的改造需要以基因工程为基础
C.蛋白质工程操作过程中，不需要酶和载体作为工具
D.经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状不可遗传
11.近年来，花卉市场上出现了一种名为“手指植物”或者“试管植物”的新型工艺品，它们经植 物组织培养技术获得，并终生生长在密闭的、无菌玻璃瓶内的培养基上，代谢缓慢，极具观赏 价值。下面关于“手指植物”说法错误的是（ ）
A．购买者不需要向“手指植物”额外补充水分和营养物质B．“手指植物”的成功培育并未体现细胞全能性
C．“手指植物”在培育过程中要经历脱分化和再分化 D．“手指植物”的培育方式属于无性繁殖
12.北京农林科学院作物所的胡道芬等育种专家历经 6 年时间成功培育出冬小麦新品种京花 1 号， 其因具有高产、质佳、抗病性强、适应性较广等优点已广泛推广种植。该新品种小麦培育方案如下：选择具有优良性状的两个亲本杂交得到 F1，取 F1 代花药培养并经染色体加倍选育。下图是京花 1 号育种过程的部分示意图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．图示用秋水仙素处理愈伤组织，因为愈伤组织分裂旺盛，有利于秋水仙素发挥作用 B．图示愈伤组织由一团高度液泡化、排列疏松而无定形状态的薄壁细胞组成
C.若用聚乙二醇取代图示中的秋水仙素，也可获得染色体加倍的愈伤组织细胞
D.试管苗在移栽前，最好用流水清洗根部培养基，再移入消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生长 一段时间
13.
植物组织培养过程中无菌操作很重要，某植物组织培养实验室培养的菊花愈伤组织被真菌严重 污染，为查找污染原因设计了 4 个实验，实验遵循单一变量原则，得到下列实验结果，据此可得出的初步结论是（ ）
A．提高培养温度能解决污染问题 B．调整培养基 pH 能解决污染问题
C．延长培养基灭菌时间能解决污染问题 D．污染主要来自组织培养的离体组织14．植物细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列材料选择不合理的是（ ）
A．以胚状体、不定芽等为材料经过人工薄膜包装得到人工种子B．选择菊花幼嫩组织比衰老组织进行组织培养易获得菊花植株C．对愈伤组织进行诱变处理易获得植物新品种
D．选择草莓的茎尖进行组织培养可获得抗病毒草莓
15．科学家利用植物细胞工程培育出的“白菜-甘蓝”同普通白菜相比，具有生长周期短、耐热性强 和易于贮藏等优点。下列选项对科学家成功培育“白菜-甘蓝”新品种影响最小的是（ ） A．白菜和甘蓝的生殖隔离问题 B．选择具有优良性状的白菜和甘蓝
C．白菜和甘蓝之间的融合技术 D．杂种细胞“白菜—甘蓝”愈伤组织的诱导和再分化16．某生物兴趣小组欲利用西瓜的品种甲和品种乙培育无籽西瓜，已知西瓜的染色体数目 2n=22，胚
乳是由父本产生的一个精子和母本的两个极核（极核遗传物质与卵细胞细胞核的遗传物质相同） 融合而产生。下图是相关育种流程图，①②③④⑤代表相应的过程，甲乙丙丁分别为育种方式， 下列相关说法错误的是（ ）
A．甲育种方式结合了植物体细胞杂交技术和花药离体培养技术B．甲乙丙丁四种育种方式培育出的无籽西瓜均属于可遗传的变异C．过程②⑤均需要品种乙的花粉刺激才能得到无籽西瓜
D．过程①③④用到的试剂中只有③为植物生长调节剂
17.下表中有关消毒与灭菌的描述错误的是（ ）
常用方法 应用举例
消毒 ① 日常用品
② 不耐高温的液体
③ 皮肤
灭菌 灼烧灭菌法 ④
干热灭菌法 ⑤
高压蒸汽灭菌法 ⑥
A．若要彻底除去物体内外的芽孢和孢子，只靠方法①②③是不行的 B．牛奶、啤酒等则通常用方法②消毒，④可以为接种针、涂布器等灭菌C．⑤⑥灭菌时，灭菌物品均不能与箱壁或桶壁接触，其原因不同
D．培养皿、培养基灭菌均可采用⑤⑥方法
18.下列有关大肠杆菌的分离与培养的叙述，正确的是（ ）
A．在大肠杆菌培养基中，由牛肉膏提供维生素，由蛋白胨提供磷酸盐，而琼脂起凝固作用 B．平板划线法是通过连续划线的方法将聚集的菌种分散并计数
C．平板划线法接种时，在接种之前及每次划线操作之前都要对接种环进行灭菌 D．纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养
19.临床使用抗生素前，往往需要做细菌耐药性实验。为了探究该某病菌对于不同抗生素的敏感性， 某同学做了如下实验：将含有 A1、A2、A3、A4 的四种抗生素的滤纸片（四种抗生素浓度相同， 四个滤纸片大小一致）分别放在含该病菌的培养基上的不同位置上。培养一段时间后，含 A1 的滤纸片周围没有出现透明圈，含 A2 的滤纸片周围出现透明圈；含 A3 的滤纸片周围的透明圈比含 A2 的小，含 A4 的滤纸片周围的透明圈也比含 A2 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，分析错误的是（ ）
A.在敏感性实验前可通过稀释涂布平板法分离纯化该病菌
B.滤纸片周围透明圈的大小反映了该病菌对不同抗生素的敏感性的差异，且对 A2 抗生素最敏感
C.从实验结果分析，该菌对抗生素 A1 最不敏感，在治疗该病菌引起的疾病时，不应选择 A1
抗生素
D.将 A4 透明圈中出现的菌落与培养皿中未覆盖滤纸片处的菌落进行比对，若无形态差异，则
A4 中无突变产生
20.下列有关稀释涂布平板法计数和显微镜直接计数法的描述不正确的是（ ） A．利用血细胞计数板计数属于显微镜直接计数法，其缺点是不能区分死菌与活菌 B．两种计数方法，其统计值与实际值相比，均有差异，但差异原因不同
C.两种计数方法均能在计数的同时能观察到所研究微生物的形态特征
D.当菌落数目稳定时，一般选取菌落在 30～300 的且差异不大的平板进行计数
第Ⅱ卷（非选择题）
二、非选择题（共 4 大题，共 60 分）
21．（17 分）北方盛产山楂，常添加白砂糖和酵母菌进行发酵，酿成甜美的山楂酒。如果将山楂酒过滤后稀释下，再添加醋酸菌，在一定条件下发酵，还可生产山楂果醋，据此分析并回答下列问题：
（1）酵母菌的代谢类型是 。在酒精发酵过程中，发酵液的 pH 会逐渐下降，原因 。
（2）酒精发酵前加入的白砂糖主要是为菌种提供 ，下图表示白砂糖的添加量对酒精生成量的影响，白砂糖的含量为 左右最为合理。
（3）酿制山楂酒时，一般要先通气的目的是 。
（4）醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源 （填“充足”或“缺少”）。若发酵原料中已含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将糖发酵为醋酸？ ，说明原因： 。为鉴定山楂果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、 嗅之外，还可以通过 作进一步的鉴定。
（5）若山楂酒全部制成了山楂果醋，则此过程中 CO2 的产生量是（ ）
A．制山楂酒时酒精发酵产生 CO2 量的两倍 B．与制山楂酒时酒精发酵产生 CO2 量相等
C．制山楂酒时酒精发酵产生 CO2 量的一半 D．几乎为零
22．（13 分）土地油污染造成高浓度油酸侵入土壤，破坏了原有生态的循环体系。某校生物兴趣小组同学欲从土地油污染的土壤中筛选出能高效降解油酸的菌株并纯化该菌株。
（1）若要在土壤样品稀释液中筛选出能降解土地油污染的菌株，则需接种以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）A 同学采用平板划线法纯化菌种，若操作时发现第一区域的划线上长满了菌落，第二区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落（如上图），则可能的原因是： 或 。
（3）B 同学用稀释涂布平板法筛选并统计菌株数目。使用灼烧灭菌后的 将菌液均匀的涂布在培养基表面，并 培养皿，使菌液分布均匀。
（4）C 同学和 D 同学均用稀释涂布平板法测定同一样品中该菌株数。均在对应稀释倍数为 106 培养基中，C 同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为 68，D 同学在该浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为 55、80、75。
请评价哪位同学的结果有可能偏离真实值，并说明理由。
另一名同学统计的结果，每毫升样品中的该细菌数为 个（接种时所用的稀释液体积为 0．1mL）
（5）E 同学采用血细胞计数板计数，统计了 5 个中格的细菌数(计数板规格 25×16），并计数出 5 个中格共有 40 个该细菌，则每毫升样品中细菌数为 个。（稀释的倍数为 102）
23．（16 分）两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。请回答下列问题
（1）过程①中普通小麦细胞和中间偃麦草细胞分别取多个的原因是 ，③要用到方法有 两大类，过程②紫外线的作用是 ，原生质体不能在低渗培养液中培养，原因是 ， 原生质体融合成功的标志是 。
（2）杂种细胞通过过程④培养得到杂种植株要借助 技术，该技术的原理是 ，操作过程中严格无菌的原因是 。
（3）现采用特异性引物对普通小麦和中间偃麦草的基因组 DNA 进行 PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，用于过程④培养的杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株 1-4 进行 PCR 扩增的结果。据图判断, 再生植株 1-4 中一定是杂种植株的有 ， 判断依据是 。若要筛选得到耐盐的小麦，需要将杂种植株种植在 的土壤中。
24．（14 分）以下是有关冠状病毒的相关信息，请思考并回答
（1）引起人类肺炎的某冠状病毒（nCoV）是一种单链 RNA 病毒，其跨膜表面糖蛋白（GP）是该病毒侵染宿主细胞的关键蛋白，科学家欲利用大肠杆菌作为受体菌批量生产 GP 以制备相关疫苗， 研发疫苗要在短时间内大量快速生产探针可利用 技术实现。从 nCoV 基因组中分离出的 nCoV-GP 基因不能直接与质粒重组，其原因是 。
（2）为了使 nCoV-GP 基因和质粒构建基因表达载体，必须经过 形成 再进行扩增两个过程，示意图如下。图示过程中需要的酶有 ， 需要添加的原料为 ，如果图中共有 N 个箭头（N>2），以 DNA1 这条链为模板开始扩增，共消耗引物“” 个，共产生由 DNA2 和 DNA3 两条链组成的 DNA 分子 个。
（3）若第（2）问中实验操作没有失误，PCR 反应却没有得到到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有 （填序号：①升高退火温度，②降低退火温度，③重新设计引物），请说明选择以上改进措施的原因 。
2021年春季鄂东南省级示范高中教育教学改革联盟学校期中联考
高二生物参考答案
一、答案
1-5DCBDD 6-10CCCDB 11-15BCDDA 16-20B/C DCDC
21．（17分，除标注外，每空2分）
（1）异养兼性厌氧型（1分） （没有“异养”不给分） 细胞呼吸产生二氧化碳，可形成碳酸；代谢过程中还产生了其他酸性物质（答出“细胞呼吸产生二氧化碳，可形成碳酸”就可以给2分）
（2）碳源 15%
（3）让酵母菌在有氧条件下大量繁殖
（4）缺少(1分） 不能（1分）
醋酸菌为好氧菌，（1分）酒精发酵旺盛时为无氧环境，此时不能形成醋酸 （1分）
检测和比较醋酸发酵前后的pH（或在显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌，并统计其数量）
（5）D
22．（13分，除标注外，每空1分）
（1）油酸 选择
（2）接种环灼烧后未冷却 未从第一区域末端开始划线
（3）涂布器 转动
（4）C 没有设置重复组实验，结果不具有说服力（2分，未说出重复组不得分） 7×108（2分）
（5）2 ×108（2分）
23．（16分，除标注外每空1分）
（1）融合成功率不是100% （意思正确即可得分，2分，） 物理和化学
使中间偃麦草的染色体断裂（2分）
维持原生质体正常的形态和结构（或避免原生质体吸水胀破）（2分）
杂种细胞再生细胞壁
（2）植物组织培养技术 植物细胞全能性
外植体体积小，抗性差，对培养条件要求比较高（1分）；培养基营养丰富，一旦被污染，杂菌不但会争夺营养，且会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡（1分，答出争夺营养就可得1分）
（3）1、2、4 它们同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段（2分） 高盐
24．（14分，除标注外，每空1分）
（1）PCR nCoV的基因为单链RNA（1分），不能直接与DNA相连（1分）
（2）反转录（或逆转录） cDNA 逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶或耐高温的TaqDNA聚合酶） （2分，两种酶答全得分）
4种游离的脱氧核苷酸（或dNTP） 2N-2 2N-2-1
（3）②③（2分，答全得分）
选②原因是温度过高引物与模板无法形成局部双链（1分）；选③原因是引物内部或两种引物之间出现局部碱基互补配对现象，从而无法发挥作用（1分）（所选序号与原因对应才能得分）
二、解析
1．D
【解析】
A项：酒精发酵利用的主要微生物是酵母菌，醋酸发酵利用的主要微生物是醋酸菌。
B项：粉碎能够使原料颗粒变小，表面积增大，使原料与微生物充分接触，加速淀粉分解，从而有效缩短酿醋时间；
C项：α-淀粉酶可催化淀粉水解
D项：酵母菌生长繁殖的最适温度在20℃左右，醋酸菌生长繁殖的最适温度是30～35℃。因此与醋酸发酵相比酒精发酵需要在较低温度条件下进行。
2.答案：C
【解析】
酸菜制作起主要作用的微生物是乳酸菌。导致泡菜水的表面长白膜的微生物是酵母菌（或产膜酵母）。由于乳酸菌呼吸作用不产生二氧化碳。测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
3.答案：B
解析：略
4.答案：D
解析：略
5.D
【解析】转基因抗虫棉实现了基因跨物种间的基因重组，表明苏云金杆芽孢菌与棉花的DNA空间结构及组成基本相同；成功表达，即基因指导蛋白质合成的过程和条件基本相同，故选D.
6.C
【解析】略
7.C
【解析】：CRISPR/Cas9基因编辑系统由SgRNA和Cas9组成，核糖体只能合成蛋白质，不能合成RNA，故C错误；Cas9切割与SgRNA配对的靶基因DNA序列，故为限制酶，A正确；gRNA是根据靶基因设计的，所以靶基因不同，SgRNA的核苷酸序列也不同，B正确；检测目的基因是否导入染色体DNA上，可以用DNA分子做探针，进行DNA分子杂交，故D正确
8.C
【解析】由于目的基因由载体导入受体细胞，所以首先要加入与标记基因相关的抗生素青霉素选择出含质粒的细胞，此时培养基上存活的细胞有两类，分别是含空质粒和含重组质粒的，由于目的基因的插入位点在lacZ’内部，故重组质粒的lacZ’被破坏，而不能将X-gal变成蓝色，所以是X-gal是lacZ’基因是否被破坏的颜色指示剂，故要添加进去，所以答案选C
9.D
【解析】
基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗的目的，并不是把缺陷基因诱变成正常基因，也不需要受精卵作为受体细胞故A错误，C错误。由于甲同学得到的表达载体出现目的基因与质粒反向链接现象，故得到的表达载体种类要多些，B错误。
10.B
【解析】蛋白质工程和基因工程的都要对基因进行操作，故A错；蛋白质工程要通过基因工程实施，故C错；由于是对基因进行的改造，遗传物质已经改变，属于可以传的变异，故D错
11.B
【解析】“手指植物”是人们通过植物组织培养技术培养而来，故培养基能够满足它的需求，所以A正确；手指植物为个体水平，体现了植物细胞全能性，故B错误；植物组织培养成个体，需要经历脱分化和再分化，且属于无性繁殖，故C、D正确。
12.C
【解析】愈伤组织有细胞壁结构，聚乙二醇无法诱导愈伤组织细胞融合，故无法让染色体加倍，故C错误
13.D
【解析】略
14.D
【解析】略
15.A
【解析】白菜和甘蓝本来就属于两个物种，所以不需要考虑他们的生殖隔离问题，故A正确。由于期望获得具有优良性状的杂种植物，所以BCD都是要考虑的问题。
16.BC
17.D
【解析】对消毒灭菌常用方法的考查。A选项常用的消毒方法并不能除去孢子和芽孢，若要除去芽孢和孢子，则需要灭菌，所以A选项正确；牛奶、啤酒等这些不耐高温的，常用的方法是巴氏消毒法，对于金属操作工具常用灼烧灭菌法，B选项正确；干热灭菌时，灭菌的物品不与灭菌箱内壁接触，防止包装纸烤焦起火；高压蒸汽灭菌时，锥形瓶与试管口不与桶壁接触是为了避免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞，C选项正确；培养基不能用干热灭菌法，只能使用高压蒸汽灭菌，所以D选项错误！
18.C
【解析】大肠杆菌的培养基中牛肉膏提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供碳源、氮源和维生素，A选项错误；B选项涂布平板法可计数，平板划线法只能对菌种进行分离，B选项错误；C选项取种之前是为了杀死接种环上所有的微生物，每次划线前是为了杀死上一次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线菌种直接来源于上次划线的末端，C选项正确；D选项中培养基培养时培养箱中即可，不需要放摇床上，D选项错误！
19.D
【解析】在耐药性实验中，若该菌对某抗生素敏感，则该抗生素导致该菌死亡，会在滤纸片下及周围出现透明圈。由本实验现象可知，该病菌对A1抗生素最不敏感，对A2抗生素最敏感，A4透明圈中出现一个菌落可能是基因突变的结果，故而BC正确；A选项中为研究该菌分离纯化常用稀释涂布平板或平板划线法，本实验区分菌落，需在培养皿中均匀分布，故而用稀释涂布平板，A项正确；D选项中A4中新出现新菌落，遗传物质改变，但菌落的形态上不一定发生变化，故而D选项错误！
20.C
【解析】A选项显微镜计数无法区分死菌和活菌，A选项正确；B选项涂布平板法时，当多个细菌连在一起时，平板上观察的往往是一个菌落，故而统计值比实际值小，显微计数时菌体死亡，有些菌体结构被被坏，导致统计值下降，所以B选项正确；C选项中涂布平板观察到的是菌落的形态，而不是微生物的形态，故而C选项错误；D选项中，一般选用30至300的菌落的平板进行计数，所以D选项正确！
21.
【解析】略
22.
【解析】（1）选择培养基是允许特殊种类的微生物的生长，同时抑制或者阻止其他微生物的生长的培养基。在该题干中，土壤中有大量的油酸，按照题干信息，是要能够高效降解油酸的菌株，所以，以油酸为唯一碳源的固定培养基，培养基中就能让该菌株生存，而其他菌株无法生存，即为选择培养基。
（2）A同学平板划线时，第一区域出现了菌落，说明菌株培养较好，第二区域的第一条线上无菌落，其它线上有菌落，说明该线上无菌株！故接种环灼烧后未冷却，或未从第一区域开始划线！
（3）该题为稀释涂布平板法的操作！应使用涂布器，涂布时要转动培养皿使其分布均匀。
（4）为避免偶然因素对实验结果的影响，该实验需要多设置几组平行对照实验。故C同学的实验可能存在着偏差。将D同学的三个平板中的菌落，求平均值！平均值为70，70／0.1×稀释的倍数;（5）40÷5×25x104
23.
【解析】（1）由于植物原生质体融合是随机的，存在不融合及同种细胞融合的情况，所以每种细胞要选多个；③为诱导原生质体融合，常用的方法有物理和化学方法；依据题意，紫外线是创造条件使中间偃麦草的染色体断裂；要保证原生质体有正常的生理活性，必须要有正常的形态和结构，不能发生舌头吸水或失水，故选择等渗溶液；原生质体融合后要再生细胞壁称为正常细胞，因为细胞壁有保护支持作用。
（2）由细胞发育成个体依据的是植物细胞全能性，必须经过植物组织培养技术，由于外植体体积小，抗性差，对培养条件要求比较高，故眼严格无菌操作。
（3）由于124同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段，所以一定是杂种植株；若要得到耐盐小麦，需要进行个体水平的性状鉴定，所以要在高盐土壤中栽培。
24.
【解析】略
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